Jensen Ackles gençken modellik yaptı ve 1997 yılında Llyod V. Berkener High School'dan mezun olduktan sonra Dady Of Our Lives adlı dizide rol aldı.Bu diziden sonra Jensen, James Cameron'un Dark Angel adlı tv serisi için Vanceuver'a gitti. 2003'te Dawson's Creek adlı dizide C.J rolünü oynadı. 2004'te Smallville adlı dizide oynamak için tekrar Vancaouver'a geri döndü ve bu dizide Jason Teague adlı karakteri canlandırdı. Son olarak 2005 yılında WB'nin yeni korku serisi Supernatural'daki Dean Winchester karakteri ile ekranlara geri döndü. Ayrıca Supernatural dizisinde rol aldığı Jared Padalecki(Sam Winchester)ve Misha Collins (Castiel) ile yakın arkadaş.Kendisi Dean karakteri ile hem ABD hemde dünya çapında büyük bir ün kazandı.Aynı yıl içinde oynadığı filmlerle birlikte oyunculuğunu kanıtlamayı başardı. Bu dönemde Alen Rasinlic'in desteği ile yeni film projelerine de sıcak bakmaya başlamıştır. Şu anda yeni bir dizi projesi bulunuyor.